广州劢博仪器有限公司产品服务包括:非洲猪瘟病毒检测、核酸提取纯化、PCR、荧光定量PCR、猪瘟检测、非洲猪瘟检测、全自动核酸提取纯化系统、病毒核酸提取系统、非洲猪瘟病毒快速检测试剂盒。我们的客户对象是食品企业/公司/厂、食品加工企业/公司/厂、冷冻食品加工企业/公司/厂、养殖场、养猪场、屠宰场、生猪屠宰场。
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生猪屠宰企业作为产业链条上的重要主体,防控动物疫病、保证产品质量安全是应尽的责任。屠宰厂(场)生产设施设备和环境一旦被污染,病毒更易长期存活,更易在生猪和猪肉产品中循环扩增,成为病毒的“储存器”“扩增器”。生猪屠宰厂(场)连接着生猪产销等上下游环节,便于“顺藤摸瓜”及时发现和追溯潜在风险。相比其他环节,在生猪屠宰厂(场)开展检测更容易采集样品,实现Zuii大限度的检测覆盖面,结合临床和剖检情况综合判断。从目前情况看,大部分屠宰厂(场)能够开展非洲猪瘟病毒自检。
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对检测的要求是:生猪屠宰厂(场)应当在驻场官i方兽医监督下,按照生猪不同来源实施分批屠宰,每批生猪屠宰后,对暂储血液进行取样并检测非洲猪瘟病毒;或者根据实际情况,在生猪进场前以生猪运输车辆为单位采集全部生猪血液样品,混合后进行检测。屠宰过程中发现疑似非洲猪瘟典型病变的,要立即停止屠宰,将可i疑生猪转至隔离间,并采集病变组织和血液样品进行检测。对检测结果应用的要求是:屠宰厂(场)检测非洲猪瘟病毒为阴性且按照检疫规程检疫合格的,驻场官i方兽医方可出具动物检疫证明,并注明检测方法、日期和结果等信息。
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非洲猪瘟为何难以控制?非洲猪瘟病毒基因组全长 170~190 kb,为有囊膜的双链 DNA 病毒,病毒粒子大小为 175~215nm,呈正二十面体结构,也是唯i一的虫媒DNA病毒。非洲猪瘟病毒是一种急性、热性、高度接触性传i染病,引起猪的死i亡率可达100%,并且非洲猪瘟具有潜伏期,感i染病毒,但没有临床症状,就有可能通过非实验室检验技术关卡流入市场,进而导致下游食品企业相关问题的出现。
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非洲猪瘟与传统猪瘟相似且综合症状复杂难辨,临床上类似于急性猪瘟,表现为高热、皮肤充血、流i产、水肿和脏器出血。我国因之前不属于非洲猪瘟i疫情国家,没有相关的针对性研究,屠宰场核酸提取纯化,目前采用的是原农i业部检疫所于1997年与美国梅岛动物病研究所共同研究的检测方法,主要是PCR和ELISA,标准遵循GB/T18648-2002非洲猪瘟诊断技术。随着相关检测技术的发展,对于非洲猪瘟的检测方法也更加完善。PCR技术是目前Zuii简单、快速的分子学检测方法,但该方法的敏感性有限,以PCR为基础的更新方法应运而生。
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PCR扩增时在加入一对引物的加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;刚开始时,探针结合在DNA任意一条单链上;PCR扩增时,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。
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实时荧光定量PCR的出现,极大地简化了定量检测的过程,真正实现了绝i对定量。多种检测系统的出现,使实验的选择性更强。自动化操作提高了工作效率,反应快速、重复性好、灵敏度高、特异性强、结果清晰。随着生物芯片技术和荧光探针定量技术的结合,荧光定量PCR在医学检测及其他各个领域中的应用前景将更加广阔,令人欣喜。如此我们也应清晰认识到,FQ-PCR技术在我国各个研究领域的应用并不多见,这就需要我国学者迎头赶上,使FQ-PCR技术更充分地i推广,以推动研究工作的快速发展。
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