花青素总量含量检测 （植物天然色素）

花青素是一类广泛存在于植物中的水溶性天然色素，具有抗氧化、抗炎等多种生物活性。

以下是关于花青素总量含量检测的全面、专业的解读。

检测目的

原料质量控制：评估富含花青素的原料（如蓝莓、紫薯、黑枸杞、紫玉米等）的质量等级。

产品开发与宣称支持：为功能性食品、饮料、化妆品的开发提供配方依据，并支持产品“富含花青素”等功能性宣称。

工艺优化：评估不同提取、加工、储存工艺对花青素保留率的影响。

科学研究：研究不同植物品种、生长条件下的花青素积累规律。

核心检测方法

花青素总量的检测通常不涉及分离单一花青素，而是利用其共同的化学特性进行总量测定。Zui经典和的方法是 pH示差法。

pH示差法

地位：国标方法，Zui常用、Zui经济、可靠性高的方法。

标准依据：

GB/T 22244-2008 《保健食品中前花青素的测定》（注：此标准测前花青素，但pH示差法的原理和应用非常相似，是行业通用做法）。

国际上也普遍采用此方法，原理一致。

检测原理：

结构转化：花青素在不同pH值下会发生结构互变，从而导致其颜色和吸光度发生显著变化。

在pH 1.0的缓冲液中，花青素主要以红色的 flavylium 阳离子形式存在，此时在Zui大吸收波长（通常 around 520 nm） 下有强吸收。

在pH 4.5的缓冲液中，花青素转变为无色的甲醇假碱或浅黄色的查尔酮形式，在520 nm处的吸光度急剧下降或消失。

差值计算：通过测量同一花青素溶液在两种pH条件下的吸光度差值，可以排除其他有色物质（如叶绿素、类胡萝卜素）的干扰，从而专一地计算出花青素的含量。

检测流程：

样品提取：用酸化的甲醇或乙醇（如含1%）对样品进行避光浸提或超声提取，将花青素溶解出来。

溶液配制：将提取液分别用 pH 1.0 和 pH 4.5 的缓冲液进行jingque稀释。

吸光度测量：在520 nm 和 700 nm 波长下，分别测量两个pH条件下溶液的吸光度。

测量700 nm是为了校正溶液的浊度。

结果计算：

A = [(A₅₂₀ⁿᵐ - A₇₀₀ⁿᵐ)ₚₕ₁.₀ - (A₅₂₀ⁿᵐ - A₇₀₀ⁿᵐ)ₚₕ₄.₅]

花青素总量（以某种矢车菊素葡萄糖苷计，mg/L）= (A × MW × DF × 1000) / (ε × l)

A： 吸光度差值

MW： 矢车菊素-3-葡萄糖苷的分子量（449.2 g/mol）

DF： 稀释倍数

ε： 矢车菊素-3-葡萄糖苷的摩尔消光系数（26,900 L/mol·cm）

l： 比色皿光程（cm）

Zui终结果：通常表示为 毫克矢车菊素-3-葡萄糖苷当量/100克样品（mg C3G/100g） 或 毫克矢车菊素-3-葡萄糖苷当量/升（mg C3G/L）。