医用产品无菌试验检测（证明无菌生长）

核心概念与目的

无菌：指产品上没有任何存活的微生物。这是一个juedui化的概念，在统计学上，它意味着在一定的置信水平下，每件产品上存活动微生物的概率低于一个极低的值（如10⁻⁶）。

检测目的：

放行检验：对Zui终灭菌的医疗器械或药品进行批量放行，确保其达到无菌要求。

工艺验证：验证灭菌工艺（如环氧乙烷、辐射、蒸汽灭菌）的有效性和重现性。

质量控制：监控生产环境、原材料和工艺流程的微生物控制水平。

主要检测方法

无菌试验不是简单地在培养基里泡一下，而是有严格的方法学要求。主要分为两大类：

1. 培养基直接接种法

原理：将一定量的样品或样品浸提液直接接种到两种不同的无菌培养基中，在适宜的温度下培养，观察是否有微生物生长。

流程：

在无菌条件下，将产品本身或其浸提液等份接种到硫乙醇酸盐流体培养基和胰酪大豆胨液体培养基中。

FTM 主要用于培养厌氧菌和需氧菌，在30-35°C下培养。

TSB 主要用于培养需氧菌和真菌，在20-25°C下培养。

培养至少14天，并定期观察培养基是否变浑浊（指示微生物生长）。

优点：操作直观，适用于不能过滤或过滤困难的样品。

缺点：灵敏度较低，样品中的抑菌性成分可能干扰结果。

2. 薄膜过滤法（shouxuan和主流方法）

原理：这是药典和标准中Zui推荐的方法。通过滤膜过滤样品溶液，将可能存在的微生物截留在滤膜上，用冲洗液去除样品的抑菌性，Zui后将滤膜分割后分别放入上述两种培养基中培养。

流程：

将样品用适宜的稀释液溶解或浸提。

通过无菌操作，将溶液倒入无菌滤膜过滤装置中，利用真空或压力使其通过孔径为0.45μm的滤膜。

用足量的冲洗液（如pH 7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液）冲洗滤膜，以消除样品本身的抑菌作用——这是确保试验有效性的关键步骤。

将滤膜取出，分割后分别浸入FTM和TSB培养基中，或使用全封闭的薄膜过滤系统直接将培养基泵入滤筒。

在规定的温度下培养至少14天。

优点：

可处理大体积样品，提高检测灵敏度。

能有效消除样品的抑菌性，结果更可靠。

适用于大多数可溶性药品、注射液和小型医疗器械的浸提液。

标准与法规

无菌试验必须严格遵守以下法规和标准：

《中华人民共和国药典》 - 通则 1101 无菌检查法

guojibiaozhun：

ISO 11737-2:2019《医疗产品灭菌 微生物学方法 第2部分：灭菌过程的定义、确认和维护中所进行的无菌试验》

USP

EP 2.6.1 Sterility (欧洲药典)

这些标准详细规定了方法适用性、培养基制备、验证、操作细节和结果判断。