食品中氨基酸含量是什么流程呢?
由于氨基酸种类丰富,结构相似,仅很小部分能产生紫外或荧光相应,为了提高分析检测灵敏度和分离选择性,让氨基酸衍生化,接上发光或发色基团,进行定性定量分析,该方法成为衍生化间接分析法。衍生化间接分析法按衍生时间不同分为柱前衍生法和柱后衍生法。柱后衍生化是将样品组分利用色谱柱分离,进行衍生化处理并检测的过程。衍生试剂一般为茚三酮和邻苯二甲醛。柱后衍生技术与柱前衍生技术相比,其优点是反应重复性好;缺点是限制了衍生化条件。
目前我国在食品/饲料行业领域,以下相关国家标准正在实施,其中测定游离氨基酸涉及的主要检测方法为:茚三酮柱后衍生化法和高效液相色谱法。
GB/T18654.11-2008 | 养殖鱼类种质检验 第 11 部分:肌肉中主要氨基酸含量的测定 |
GB/T18246-2000 | 饲料中氨基酸的测定 |
GB/T5009.124-2003 | 食品中氨基酸的测定 |
GB/T8314-2013 | 茶 游离氨基酸总量的测定 |
GB/T30987-2014 | 植物中游离氨基酸的测定 |
GB/T14924.10-2008 | 实验动物配合饲料 氨基酸的测定 |
GB/T32016-2015 | 蚕丝 氨基酸的测定 |
现以 GB/T5009.124-2003《食品中氨基酸的测定》为例,简述使用氨基酸自动分析仪测定食物中氨基酸的方法,其原理是:食品中的蛋白质经盐酸水解成为游离氨基酸,经氨基酸分析仪的离子交换柱分离后,与茚三酮溶液产生颜色反应,再通过分光光度计比色测定氨基酸含量。
该方法适用于食品中的天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、撷氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸和精氨酸等十六种氨基酸的测定。其Zui低检出限为10pmol。不适用于蛋白质含量低的水果、蔬菜、饮料和淀粉类食品中氨基酸测定。