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化妆品急性经皮毒性试验原理 步骤 毒理性测试

更新:2023-11-03 23:00 发布者IP:58.62.164.160 浏览:4次
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急性经皮毒性试验
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产品详细介绍

原理

试验前首先选择适合的试验动物。在试验时先去除试验动物受试部位的被毛,同时将固体废物制成液态试样。将试验动物分成若干剂量组,每组涂布不同剂量的受试样品,而后观察试验动物中毒反应和死亡情况,计算LD50。对试验中死亡的动物做大体解剖和病理学检查,对试验结束时的存活动物也应做大体解剖。根据引起试验动物死亡一半的剂量判断该废物是否为危险废物。仪器设备电子天平、动物体重秤、外科剪刀、镊子以及常规玻璃仪器等。

试剂

苦味酸酒精饱和液②:取95%乙醇100mL,在不断搅拌下加入苦味酸,直到有不溶苦味酸晶体存在。

步骤一:试验动物的选择

选用大鼠、小鼠、豚鼠或家兔,小鼠体重18-22g,大鼠体重180耀20g,豚鼠350-450g,家兔200-30g。成年健康的试验动物进入实验室后,应适应环境3-5d。试验前试验动物应禁食(一般16h左右),不限制饮水。若采用代谢率高的其他动物,禁食时间可以适当缩短。正式试验时,称量动物体重,随机分组。用苦味酸(C6H3N3O7)酒精饱和液在动物身上做标记。

步骤二:试样制备

将危险化学品放入已知质量的容器内称量,加溶剂溶解或稀释,倾入刻度容器内,摇匀,再加溶剂至刻度,算出浓度③备用。将受试样品溶解或悬浮于适宜的赋形剂中,应选水或食用植物油(如玉米油)作溶剂,也可考虑使用其他赋形剂(如羧甲基纤维素、明胶、淀粉等)配成混悬液;不能配制成混悬液时,可配制成其他形式(如糊状物等),但不能采用具有明显毒性的有机化学溶剂。如采用有毒性的溶剂应单设溶剂对照组观察。

步骤三:剂量确定

根据所选用的方法要求,原则上应设4耀6个剂量组④,每组动物为10只,雌雄各半。如果受试物毒性很低,也可采用一次限量法,即用10只动物(雌雄各半)皮肤涂抹50mg/kg体重剂量,如未引起动物死亡,则不再进行多个剂量的急性经皮毒性试验。

步骤四:试验动物准备

试验开始前24h,剪去或剃除动物躯干背部拟染毒区域的被毛,去毛时应非常小心,不要损伤皮肤以免影响皮肤的通透性。涂皮面积约占动物体表面积的10%,应根据动物体重确定涂皮面积。体重为20耀30g的大鼠约为30耀40cm2,体重为2耀3kg的家兔约为160耀210cm2,体重为350耀450g的豚鼠约为46耀54cm2。

步骤五:染毒

将受试物均匀涂敷于动物背部皮肤染毒区,然后用一层薄胶片覆盖,无刺激胶布固定,防止动物舔食。若受试物毒性较高,可减少涂敷面积,但涂敷仍需尽可能薄而均匀。

一般封闭接触24h。

注:染毒结束后,应使用水或其他适宜的溶液清除残留受试物。

步骤六:中毒表现观察

同急性经口毒性试验。

步骤七:数据处理与评价


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