消毒产品真菌杀灭试验 抑菌环试验测试
抗菌检测方法
1、抗真菌试验法
该方法是以真菌为对象的检测方法,基本原则是在样品和培养基上均匀喷洒一定量的混合孢子悬液,培养一段时间后,观察标本中的霉菌,对照真菌性能进行等级评定。
2、振动烧瓶法
模仿人体的穿着条件,使细菌在振动条件(300r/min)下与织物内抗菌药物接触,振动1-6h后经过细菌培养数计算细菌减缩率,确定抗菌性能的大小。应用该抗菌检测方法时,检测的样品不仅适用于普通织物,还适用于凹凸不平的织物、有毛或羽毛的织物、粉末织物等。
(1)金黄色葡萄球菌(ATCC 6538)、大肠杆菌(8099)、白色念珠菌(ATCC 10231) 菌悬液(见2.1.1.2)及根据抑菌剂特定用途所用的其他菌悬液。
(2)抑菌剂载体(5 mm直径园形新华一号定性滤纸片, 经压力蒸汽灭菌处理后,置120C烤干2h,保存备用)。
(3)活菌培养计数所需器材(见2.1. 1.3)。
(4)微量移液器(5μ 1~50μ 1,可调式)。
(5)游标卡尺。.
(6)营养琼脂培养基、胰蛋白胨大豆琼脂培养基与沙堡琼脂培养基
2.1.8. 2.3操作程序
(1)抑菌片的制备:对液体抑菌剂,取无菌并干燥的滤纸片。每片滴加实际使用浓度抑菌剂溶液20μ1,将滤纸片平放于清洁的无菌平皿内,开盖置温箱(37"C)中烤干,或置室温下自然干燥后备用。溶出性抗(抑)菌产品,可直接制成直径为5mm,厚不超过4mm 圆片(块),每4片(块)- -组。
(2)阴性对照样片的制备:取无菌干燥滤纸片,每片滴加无菌燕馏水20μ 1,干燥后备用。溶出性抗(抑)菌产品的阴性对照样本,应取同种材质不含抑菌成份的样品,制成与试验组大小相同的样片(块)。
(3)试验菌的接种:用无菌棉拭子蘸取浓度为5X 105cfu/ml ~ 5X106cfu/ml试验菌悬液,在营养琼脂培养基平板表面均匀涂抹3次。每涂抹1次,平板应转动60°, Zui后将棉拭子绕平板边缘涂抹一周。盖好平皿,.置室温干燥5min。.
(4)抑菌剂样片贴放:每次试验贴放1个染菌平板,每个平板贴放4片试验样片,1片阴性对照样片,共5片。用无菌镊子取样片贴放于平板表面。各样片中心之间相距25mm以上,与平板的周缘相距15mm 以上。贴放好后,用无菌镊子轻压样片,使其紧贴于平板表面。盖好平皿,置37"C温箱,培养16h~18h观察结
果。用游标卡尺测量抑菌环的直径(包括贴片)并记录。试验重复3次。测量抑菌环时,应选均匀而完全无菌生长的抑菌环进行。测量其直径应以抑菌环外沿为界。