眼刺激试验、皮肤刺激试验、皮肤致敏试验测试

眼刺激试验、皮肤刺激试验、皮肤致敏试验测试 

皮肤刺激试验

皮肤刺激是指皮肤接触受试物后产生的可逆性炎性症状。

试验方法的原则

受试物应以一次剂量或多次剂量涂(敷)于健康的无破损的皮肤上。每种

受试物至少要用4只健康成年动物。uu011

试验方法

急性皮肤刺激试验(一次皮肤涂抹实验)

1 试验前24小时，将实验动物背部脊柱两侧毛剪掉，不可损伤表皮,去毛范围左、右各约3cmX 6cm。

2 取受试物0.1ml (g)滴在2.5cmX2.5cm大小的四层纱布上敷贴在一侧皮肤上，或直接将受试物涂在皮肤上，用一层油纸覆盖，再用无刺激性胶布和绷带加以固定。另一侧涂赋形剂作为对照。敷用时间一般为24小时，亦可一次敷用4小时。试验结束后用温水或无刺激性溶剂除去残留受试物。

3 于除去受试物后1、24和48小时观察涂抹部位皮肤反应，按表1和表2进行皮肤反应积分和刺激强度评价。

多次皮肤刺激试验

1 先将实验动物背部脊柱两侧皮肤的毛剪掉或剃掉，去毛范围各为2.5cmX 2.5cm。

2 取受试物0. 1~0.5ml(g)涂抹在一侧皮肤毛，另一侧涂赋形剂作为对照，每天涂抹1~2次，连续涂抹14天每次涂药前应剪毛，不得损伤皮肤保证受试物与皮肤充分接触。

3 每天观察皮肤反应，按表1评分。脱悄积分为1。高刺激指数为14(观察次数) X8(总积分数)=112。

眼刺激试验

眼刺激性是指眼表面接触受试物后产生的可逆性炎性变化。

1 试验方法的原则

• 受试物应以一次剂量或多次剂量滴入(涂入)或喷洒眼内。

• 每种受试动物的眼睛应保证无任何炎性反应和眼损伤。

• 每组试验动物数至少4只，采用自身对照，动物为家兔。

• 受试物使用浓度一般用原液或用适当无刺激性赋形剂配制的50%软膏或其他剂型。

• 已证明有皮肤刺激性的物质，不必进行本项试验。

2 试验方法

一次眼刺激试验

• 将液态或软膏(0.1ml或100mg)受试物滴入(涂入)实验动物一侧结膜囊内，另一侧眼作为对照。滴药后使眼被动闭合5~10s，记录滴药后6、24、48和72小时眼的局部反应，第4、7天观察恢复情况。观察时应用荧光素钠检查角膜损害，好用裂隙灯检查角膜透明度、虹膜纹理改变。

• 如果受试物明显引起眼刺激反应，可再选用6只动物，将受试物滴入一侧结膜囊内，接触4s或30s后用生理盐水冲洗干净，冉观察眼的刺激反应。

• 按表4所列眼损害分级标准积分，再按表5进行眼刺激强度的评价。

多次性眼刺激试验

将受试物原液0.1ml或配制成的50%软膏约100mg滴入或涂入一侧结膜囊内，另一侧眼作为对照，每日次，连续14天。实验结束后，继续观察7~14天，按表4分级标准记录眼的刺激反应，并按表5眼刺激性评价标准进行眼刺激强度的评价。

结果评价

按上述分级评价标准评定，如一次或多次接触受试物，不引起角膜、虹膜和结膜的炎症变化，或虽引起轻度反应，但这种改变是可逆的，则认为该受试物可以安全使用。

在许多情况下，哺乳动物眼的反应较人敏感，从动物试验结果外推到人可提供较有价值的依据。