GB/T20944.1-2007
琼脂平皿扩散法
平皿内注入两层琼脂培养基,下层为无菌培养基,上层为接种培养基。试样放在两层培养基上,培养一定时间后根据培养基和试样接触处细菌繁殖的程度,定性评价试样的抗菌性能。
测试步骤如下:
1
从样品上选取有代表性的试样,每种菌试验4块(正面2块,反面2块)圆形试样,直径25mm(试样不应灭菌)。
2
准备下层无菌培养基:先向无菌平皿倾注10ml琼脂培养基,使其凝固。
准备上层接种培养基:取45℃琼脂培养基150ml加入1ml试验菌液,振荡使其分布均匀。再倒入下层无菌培养基上,待凝固后用无菌镊子将试样和对照样分别放于平皿中央,均匀按压,直到试样与培养基接触。放入37℃培养箱培养18-24h。
3
评价:抑菌带宽度=(抑菌带外径的平均值-试样直径)/2。
测定抑菌带后,用镊子将试样移去,用显微镜观察细菌繁殖情况。
根据细菌繁殖的有无和抑菌带的宽度,按照下表评价每个试样的抗菌效果。
当所有试样均满足表1中“效果好”的要求时,则认为该样品具有抗菌效果。